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Western Blot测p38秘籍 最近做了一次Western Blot,检测到了p38,分享一下经验供大家参考。 🠦体选择:使用的是Abcam的抗体,具体货号在图3和图4中。 🠧𛆨蛋白提取:用RIPA裂解液(200ul/孔,6孔板)提取细胞蛋白。 🠧᤻转膜前,加入预染蛋白煮15分钟。上样量40ug,使用雅酶预制胶10%(PAGE)进行电泳,先以80V跑30分钟,再以100V跑40分钟。Marker使用的是雅酶的。 🠨操作:在冰浴中,以230mA电流转膜90分钟,确保电压保持在130V以下。 🠥程:使用碧云天QuickBlock™ Western封闭液(货号P0252),封闭30分钟。 🠤𘀦孵育:一抗pp38和p38均按1:1000的比例用雅酶的一抗稀释液稀释,放在4度冰箱摇床上过夜。蛋白显影在41kDa左右。 希望这些信息对大家有所帮助!
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抗体试用装领取全攻略 抗体试用装领取全攻略,助你轻松获取抗体小样! Santa Cruz: 购买正装抗体后,可向销售申请3支50ul的小样,WB稀释比例为1:50。 Abcam/CST: 活动期间,购买抗体可享受买三送一或买四送一的优惠,还可顺带申请试用装,但难度较高。 적bclonal: 任意抗体均可向销售申请试用装,购买时附带10ul的小样。 젥安生物: 活动期间,每个课题组可申请三支10ul的抗体小样,种类丰富。 ️ Abmart: 通过活动申请或校园自助小样抗体机获取抗体小样,质量可靠,每人限申请3支,发货速度较慢。 堦 康基因: 向销售申请10-20ul的抗体小样。 堁bways: 向销售申请5ul的抗体小样。 𑠂ioss: 通过公主号申请试用装,每期限定几种抗体,建议经常查看。 𑠂oster: 通过公主号申请试用装,种类较少。 Proteintech: 活动期间购买抗体可获赠内参抗体。 젤𘇧𑻧物: 通过积分制申请,注册1000积分可兑换400积分的抗体小样,每人限申请3支,运费50元。 𐠤生物: 138元购买10ul的抗体小样。 젍CE: 很少人知道他们也提供抗体,每个课题组可免费申请3个小样,可选择化合物或抗体。
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